透析要多长时间完成?有没有什么标志呢?

2016-09-01技术资料

透析要多长时间完成?有没有什么标志呢?

有没有什么标志呢?是要好多天吗?是否透析袋不再胀入水就表示透析完成了?

用透析袋前,首先你肯定知道原理,以及材料的截留分子量。至于透析什么时候算彻底,这个无法一概而论。你可以参考如下思路:
1. 如果被透析的杂质分子量和你的目的物差距很大,且水中有一定溶解度(几十微克就行),那么你可以选择截留分子量尽可能大的透析袋(但不能目的物分子量),勤换水,一天三次,三天就可以了。
2. 如果杂质和目的物分子量差别不大,理论上不适合透析,如果非得用,截留分子量一定要靠近杂质,如果物质水溶性不好,而缓冲盐有不会破坏目的物,可以用缓冲盐体系透析。这需要五六天。
3. 透析是不可能把杂质透干净的,毕竟是一种温和平衡纯化方法,其Zui大的优势在于简单和温和。如果你不要求样品绝对纯净,样品又比较娇气,这是首选,如果不是,则另想办法。
4. 还有一个鉴定是否透析完全的办法,就是测透析液中杂质的浓度,(紫外吸收,荧光谱,HPLC都行,如果杂质有色,目测也行,哈哈)

一般参考文献的方法,三天到一周不等,根据具体情况而定,一般一天换水两三次吧。

与你的浓度以及换水的次数有关了,Zui好一直循环水

透析袋一般来讲,Zui好一次性利用。但是考虑到我们都是小实验室,科研经费紧张,如果对样品的纯度没有很严格的要求,还是可以重复利用的。但是不要重复利用太多次,一般5次就差不多了,而且透析时尽量避免有机溶剂(乙醇除外),因为重复多次利用或经有机溶剂腐蚀,虽然从宏观上看袋子完好,但是有可能微观上已有破损或者孔径已经改变,截留分子量(MWCO)已经不可靠。
具体的处理流程,我经常用的,供参考:
1. 将用过的袋子用清水冲洗3遍
2. 加600ml纯净水,0.18g EDTA,10g NaHCO3,煮沸15min
3. 纯净水洗3遍
4. 加600ml纯净水,煮沸15min
5. 纯净水洗3遍
6. 净化的袋子置75%乙醇中,浸泡待用(乙醇兼有抑菌和保持袋的韧性双重功能)
7.再次使用时,用纯净水洗一到两遍就可以了